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    类器官冻存液

    • 货号:LMB-DCY-100
    • 品牌:LMB
    • 规格:100ml
    • 货期:现货
    • 运输条件:2-8℃/-20℃

    目录价 :¥ 1400.00

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    • 产品描述

    产品信息

     

    产品组成

    规格

    储存条件及周期

     

    LMB类器官冻存

    50ml/100ml

    -20储存1

    类器官(或细胞)的冻存

    1. 向回收后的类器官(或细胞)中加入预冷的(2-8℃OrganoidCryopreservationMedium类器官冻存液 ,吹打混匀后迅速转移至细胞冻存管中(冻存管内细胞悬液体积应大于0.5mL) 。
      注意 :每1mL冻存液推荐冻存1x103-1x107个细胞或对应细胞量的类器官 。
    2. 将冻存管放入细胞冻存降温盒内(降温盒须提前平衡至室温或4℃) ,随后立即将降温盒放入-80℃超低温冰箱中 ;也可将冻存管进行人工梯度降温处理 ,如4℃静置10分钟 ,-20℃保存1小时 ,-80℃保存过夜 。
    3. 次日或12小时后将冻存管于低温条件下(不高于-70℃ ,推荐使用干冰或原降温盒)转移至液氮中长期保存 。

    类器官(或细胞)的复苏

    1. 10ml类器官培养缓冲液于15ml离心管中 。
    2. 从液氮罐中取出冻存的类器官细胞 ,快速置于37℃水浴锅中融解 。
    3. 水浴融解过程中 ,需轻轻摇动冷冻管 ,以确保冻存液在1-2分钟内完全融解 。
    4. 将溶解后的类器官细胞快速转移至15ml离心管,使用移液管轻轻吹打6-8次 ,300g离心5分钟 ,然后除去上清液并收集类器官细胞沉淀 。添加适量类器官缓冲液重悬移入1.5ml离心管300g离心5min 。
    5. 基质胶重悬 ,每孔25μl基质胶铺在24孔细胞培养板中 ,放置培养箱中10-15min成胶 ,添加500μl类器官培养基 。
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